Криоконсервация: кому, когда и зачем нужна

Современный ритм жизни диктует свои правила: люди все чаще откладывают планирование детей на более поздний срок — из-за карьеры, поиска партнера или жилищных вопросов или по медицинским показаниям. Однако с возрастом меняется репродуктивная функция у обоих партнеров: у женщин снижается количество и качество яйцеклеток, а у мужчин — качество спермы. Это уменьшает шансы на зачатие.

Решить проблему может криоконсервация ооцитов и спермы — технология, которая позволяет «заморозить время» и вернуться к вопросу зачатия через 5, 10 или даже 15 лет. В статье рассказываем, когда показана эта процедура, как она работает и что происходит с биоматериалом после заморозки.

Коротко о главном

1. Криоконсервация позволяет сохранить яйцеклетки, сперматозоиды и/или эмбрионы на годы вперед без потери их качества.
2. Процедура подходит тем, кто откладывает беременность или хочет сохранить фертильность перед длительным лечением, например онкотерапией.
3. Важно сохранить клетки с запасом: часть из них может не пережить заморозку и разморозку, часть — не оплодотвориться. На вероятность получения беременности также влияет возраст и общее состояние здоровья родителей.

Как работает криоконсервация: главный принцип заморозки

Краткий ответ: во время криоконсервации биоматериал обрабатывают криопротекторами и быстро охлаждают до сверхнизких температур. В результате все биохимические процессы останавливаются, и клетки могут храниться годами без потери качества.

Клетки человека примерно на 80% состоят из воды. Если просто охладить их до минусовых температур, появятся кристаллы льда, которые могут повреждать мембраны и внутренние структуры.¹

Чтобы защитить яйцеклетки и сперматозоиды, используют специальные вещества — криопротекторы, например глицерин, диметилсульфоксид, этиленгликоль или пропандиол. Они проникают внутрь клетки, заменяют собой воду и препятствуют образованию льда.¹

Существует два основных метода криоконсервации:¹

• Медленное охлаждение. Клетки постепенно обезвоживают с помощью низких концентраций криопротекторов и охлаждают до −150 ℃, после чего помещают в жидкий азот и хранят при температуре −196 ℃.
• Сверхбыстрая заморозка, или витрификация. Клетки помещают в специальный высококонцентрированный раствор для витрификации, выдерживают не более одной минуты, а затем быстро опускают в жидкий азот при температуре −196 ℃.

В таком состоянии ооциты, сперматозоиды и эмбрионы могут храниться годами и даже десятилетиями. При разморозке криопротектор постепенно удаляют, клетки возвращают в обычную среду и оценивают их жизнеспособность. Исследованиями доказано, что частота оплодотворения, получения эмбрионов высокого качества и наступления беременности одинакова для «свежих» и криоконсервированных яйцеклеток.¹

Показания для заморозки биоматериала

Краткий ответ: криоконсервацию проводят, чтобы сохранить яйцеклетки, сперму или эмбрионы для будущего лечения бесплодия, перед терапией, которая может снизить фертильность, или если человек планирует отложить рождение ребенка.

В России показания для криоконсервации регламентирует приказ Минздрава РФ от 31 июля 2020 г. № 803н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий». Заморозить биоматериал можно, если мужчина или женщина:²

• планирует в будущем использовать биоматериал для лечения бесплодия с помощью программ вспомогательных репродуктивных технологий;
• хочет сохранить фертильность перед хирургическими операциями, длительной химиотерапией или лучевым лечением по поводу онкологического заболевания;
• желает отложить создание семьи на будущее — из-за учебы, карьеры, финансовых трудностей или отсутствия подходящего партнера;
• решает стать донором спермы или яйцеклеток для пациентов с диагностированным бесплодием.

Врачи-репродуктологи также рекомендуют задуматься о криоконсервации яйцеклеток женщинам, у которых выявили снижение овариального резерва — запаса собственных яйцеклеток. Его определяют по двум показателям:²

• уровень антимюллерова гормона < 1,2 нг/мл;
• количество антральных фолликулов в обоих яичниках < 5 штук, по данным УЗИ.

Подготовка к процедуре криоконсервации

Краткий ответ: перед криоконсервацией яйцеклеток женщинам будет необходимо пройти расширенное медицинское обследование. Мужчине же достаточно будет сдать кровь на инфекции перед заморозкой материала.

Яйцеклетки

Подготовка начинается с консультации врача-репродуктолога. Специалист собирает анамнез, уточняет планы пациента или пары, а также объясняет, как проходит криоконсервация. На этом этапе важно понять, есть ли противопоказания и какого результата можно ожидать.

В естественном цикле у женщины созревает одна, реже — две яйцеклетки. Но для будущего ЭКО этого может не хватить. Поэтому, чтобы заготовить и сохранить как можно больше ооцитов, врач назначает гормональную стимуляцию под контролем УЗИ и анализов.3 Перед стимуляцией женщина проходит медицинское обследование.

После гормональной стимуляции, проводят пункцию — малоинвазивную процедуру, при которой яйцеклетки извлекают из яичников. Ее выполняют под легкой седацией, обычно за 10–20 минут. После этого эмбриологи проводят криоконсервацию.³

Как сохранить яйцеклетки?

Сперма

На этапе подготовки к криоконсервации спермы мужчина выполняет ряд дополнительных обследований:

• спермограмму и МAR-тест, которые определяют качество сперматозоидов и их способность к оплодотворению яйцеклеток;
• анализ крови на инфекции.

Сама процедура не требует медицинских вмешательств. Сперму получают путем мастурбации в специальной комнате криобанка. Однако перед сдачей биоматериала эксперты ВОЗ рекомендуют:⁷

• воздержаться от секса и мастурбации в течение 2–4 дня;
• избегать чрезмерных физических нагрузок и стресса за 3–5 дней;
• исключить алкоголь за 5–10 дней;
• отказаться от посещения бани и сауны накануне сдачи;
• по возможности прекратить прием лекарственных препаратов.

Как сохранить сперму?

Эмбрионы

При витрификации эмбрионов мужчина и женщина проходят те же основные этапы, что и при криоконсервации половых клеток: женщине необходимо медицинское обследование, стимуляция овуляции и пункция фолликулов, мужчине — сдача крови на инфекции и расширенная спермограмма.

Полученные яйцеклетки и сперматозоиды передаются эмбриологу. Оплодотворение проводят одним из методов:

• ЭКО — смешивание ооцитов и подготовленных сперматозоидов в чашке Петри;
• ИКСИ — введение одного сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки под микроскопом.

Далее эмбрионы культивируют в инкубаторе до стадии бластоцисты (обычно 5–6 суток развития). Именно на этом этапе витрификация наиболее эффективна.

На 3–5 день развития (чаще на 5–6 день) эмбрионы подвергают витрификации:

• эмбрион помещают в специальный криопротекторный раствор, который предохраняет клетки от повреждения льдом;
• затем его мгновенно охлаждают в жидком азоте (−196 °C), минуя образование кристаллов льда.

Это позволяет сохранить до 95–98% эмбрионов после размораживания. В отличие от медленной заморозки, витрификация практически не травмирует клетки.

Может ли биоматериал повредиться в процессе и что влияет на успех процедуры

Краткий ответ: биоматериал может повредиться на любом этапе криоконсервации. На успех процедуры сильнее всего влияют возраст, состояние здоровья и количество клеток, которое удалось сохранить.

Выживаемость клеток при криоконсервации спермы и ооцитов зависит от типа биоматериала и используемой технологии. Например, современные методы витрификации позволяют сохранить 95-98% эмбрионов⁸ и около 85% яйцеклеток⁴. Однако часть клеток все равно повреждается при заморозке или разморозке. Чтобы повысить шансы на успех, специалисты рекомендуют сохранить как можно больше биоматериала.

На выживаемость клеток влияет много факторов. При заморозке специалисты Репробанка учитывают:

• Индивидуальную чувствительность. В Репробанке проводят специальный тест на криотолерантность, чтобы проверить, как сперматозоиды реагируют на криоконсервацию. Если плохо, врачи рекомендуют заморозить больше материала. Но провести такой тест для женщин заранее невозможно: яйцеклеток в каждом цикле получают ограниченное количество, и все они идут на заморозку.
• Возраст. После 35–38 лет фертильность падает, качество яйцеклеток и сперматозоидов снижается, поэтому для успешной криоконсервации и последующей беременности нужно сохранять больше биоматериала.⁴
• Общее состояние здоровья. Репродуктивная функция снижается при онкологии и ее лечении, воспалительных заболеваниях или оперативных вмешательствах на органах малого таза, эндометриозе, гормональных нарушениях, курении.⁵
• Цели и планы. Чем позже человек планирует создание семьи и рождение ребенка, тем больше биоматериала стоит заморозить — это повышает шансы на успех в будущем.

Как разные виды клеток переносят криоконсервацию и как много их стоит сохранять

Краткий ответ: наиболее устойчивы к криоконсервации эмбрионы, а наименее — ооциты, поэтому для них особенно важно набрать достаточное число зрелых клеток заранее.

Каждый тип биоматериала по-разному реагирует на заморозку. Это стоит учитывать при расчете того, сколько нужно сохранить:

• Эмбрионы — наиболее устойчивые. Это многоклеточный организм: если часть его клеток умирает, он способен их восстановить. Поэтому шансы на успех процедуры с замороженными эмбрионами самые высокие.
• Сперма — можно не бояться потерь. В норме 1 мл спермы содержит не менее 15 миллионов сперматозоидов, а весь эякулят — как минимум 39 миллионов.⁶ Даже если при процедуре погибнет половина клеток, их все еще хватит для оплодотворения. Поэтому обычно мужчина сдает примерно 4 мл спермы.
• Яйцеклетки — самые чувствительные. При гормональной стимуляции женщина в норме получает около 5–10 клеток, но не все из них становятся пригодными и оплодотворяются. По данным ASRM, чтобы получить шанс примерно 70% на одного ребенка, женщине в 30–34 года нужно около 14 зрелых ооцитов, в 35–37 лет — 15, а в 38–40 лет — 26.⁴

При этом ограничений по сроку хранения биоматериала нет. Сперматозоиды, яйцеклетки и эмбрионы могут находиться в жидком азоте десятки лет. В мире известны случаи, когда клетки успешно использовали даже спустя 27 лет после заморозки.

Какие технологии помогают клиникам сохранить биоматериал

Чтобы клетки не повредились во время хранения, Репробанк использует уникальное автоматизированное криохранилище.

Оно может работать до трех недель без электричества, света и дополнительной подачи жидкого азота. Это дает гарантию, что клетки не повредятся даже в случае технических проблем.

Для сохранности биоматериала в криохранилище установлены датчики температуры, кислорода и других параметров — за ними постоянно следят эмбриологи и инженеры. Так удается поддерживать нужные для заморозки условия и увеличить процент выживаемости клеток.

Хранилище вмещает до миллиона образцов биоматериала. При этом в каждую ячейку помещают материал только одного пациента, а все пробирки подписывают и маркируют. Поэтому нет риска, что образцы перепутают.

Если материал нужно доставить — Репробанк использует технологию dry shipper. Перевозить в самолетах жидкий азот запрещено, поэтому клиника помещает биоматериал в сосуд с его парами. Это позволяет сохранять нужную температуру в течение 10–14 дней, чего хватает, чтобы доставить клетки в другую клинику.

Если вы планируете сохранить сперматозоиды, яйцеклетки или эмбрионы — обратитесь в Репробанк. Наши специалисты ответят на ваши вопросы и помогут понять, сколько биоматериала понадобится в вашем случае.

→ Сохранить сперму
→ Сохранить яйцеклетки
→ Сохранить эмбрионы

FAQ

Сколько стоит заморозить яйцеклетку?

Репробанк предлагает услугу сохранения яйцеклеток «под ключ». Стоимость — 250 000 рублей. В нее включено:

• консультация врача-репродуктолога;
• детальное медицинское обследование;
• препараты для стимуляции суперовуляции;
• витрификация (заморозка) полученных клеток;
• закладка на хранение в криохранилище Репробанка;
• хранение репродуктивного материала до конца календарного года с момента заключения договора.

В каком возрасте лучше заморозить яйцеклетки?

Оптимально — до 35 лет. В этом возрасте в организме женщины есть достаточно яйцеклеток хорошего качества, поэтому шансы на их успешное использование в будущем выше.

Сколько яйцеклеток лучше замораживать?

Ориентир — 10–15 зрелых ооцитов и больше. Точное количество зависит от возраста: чем старше женщина, тем больше клеток рекомендуют сохранить.

Можно ли заморозить яйцеклетку бесплатно?

Есть женщина в возрасте 18–35 лет полностью физически и психически здорова, она может принять участие в донорской программе Репробанка. Часть яйцеклеток в таком случае будет передана донорскому банку, а вторая часть — заморожена для личных целей женщины совершенно бесплатно.

Сколько лет хранятся замороженные яйцеклетки?

Формально срок хранения не ограничен: в жидком азоте клетки могут храниться десятки лет без потери качества. Известны случаи успешного использования яйцеклеток, которые пробыли в замороженном состоянии 14 и более лет.

Источники:
1. Whaley D., Damyar K., Witek R. P., Mendoza A., Alexander M., Lakey J. R. Cryopreservation: An Overview of Principles and Cell-Specific Considerations. Cell Transplant. 2021;30:963689721999617. doi:10.1177/0963689721999617.
2. Приказ Минздрава России от 31 июля 2020 г. № 803н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению».
3. ESHRE Working Group on Ultrasound in ART, D’Angelo A., Panayotidis C., et al. Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up†. Hum Reprod Open. 2019;2019(4):hoz025. Published 2019 Dec 10. doi:10.1093/hropen/hoz025.
4. ASRM Evidence-based outcomes after oocyte cryopreservation for donor oocyte in vitro fertilization and planned oocyte cryopreservation: a guideline. 2021.
5. Боярский К. Ю., Гайдуков С. Н., Чинчаладзе А. С. (2009). Факторы, определяющие овариальный резерв женщины. Журнал акушерства и женских болезней, LVIII (2), 65–71.
6. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen — 5th ed.
7. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, sixth edition. Geneva: World Health Organization; 2021. Licence: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.

Статья проверена:
Панова Вероника Евгеньевна

Эмбриолог

График работы: вт.-суб. с 9:00 до 21:00

+7 (499) 116-54-05

info@reprobank.ru